Scanning elektron microscopy is een techniek voor het verkrijgen van hoge resolutiebeelden van biologische en niet-biologische specimens. Het wordt gebruikt in biomedisch onderzoek om de gedetailleerde structuur van weefsels, cellen, organellen en macromoleculaire complexen te onderzoeken. De hoge resolutie van EM-beelden is het resultaat van het gebruik van elektronen (die zeer korte golflengten hebben) als bron van verlichtende straling. Scanning elektron microscopy wordt gebruikt in combinatie met een verscheidenheid aan aanvullende technieken (bijv. Dunne coupes, immunolabeling, negatieve kleuring) om specifieke vragen te beantwoorden. EM-beelden geven belangrijke informatie over de structurele basis van celfunctie en celziekte.
TEM sectie foto
Er zijn twee hoofdtypen elektronenmicroscoop: de transmissie EM (TEM) en de scanning EM (SEM). De transmissie-elektronenmicroscoop wordt gebruikt om dunne monsters (weefselcoupes, moleculen, enz.) Te bekijken waar elektronen doorheen kunnen en een projectiebeeld genereren. De TEM is in veel opzichten analoog aan de conventionele (samengestelde) lichtmicroscoop. TEM wordt onder andere gebruikt om het inwendige van cellen in beeld te brengen (in dunne plakjes), de structuur van eiwitmoleculen (in tegenstelling tot metaal schaduwen), de organisatie van moleculen in virussen en cytoskelet filamenten (bereid met de negatieve kleuringstechniek), en de rangschikking van eiwitmoleculen in celmembranen (door vriesbreuk).
EM-foto – trilhaartjes scannen
Conventionele scanning-elektronenmicroscopie is afhankelijk van de emissie van secundaire elektronen vanaf het oppervlak van een preparaat. Vanwege zijn grote scherptediepte is een scanning-elektronenmicroscoop de EM-analoog van een stereo lichtmicroscoop. Het biedt gedetailleerde afbeeldingen van de oppervlakken van cellen en hele organismen die niet mogelijk zijn met de vacuüm tribometer. Het kan ook worden gebruikt voor het tellen van deeltjes en het bepalen van de grootte, en voor procescontrole. Het wordt een scanning-elektronenmicroscoop genoemd, omdat het beeld wordt gevormd door een gefocusseerde elektronenstraal in een rasterpatroon op het oppervlak van het monster te scannen.
De interactie van de primaire elektronenbundel met de atomen nabij het oppervlak veroorzaakt de emissie van deeltjes op elk punt in het raster (bijv. Secundaire elektronen met lage energie, terug verstrooide elektronen met hoge energie, röntgenstralen en zelfs fotonen). Deze kunnen worden verzameld met verschillende detectoren, en hun relatieve aantal kan worden vertaald naar helderheid op elk equivalent punt op een kathodestraalbuis. Omdat de grootte van het raster op het preparaat veel kleiner is dan het kijkscherm van de CRT, is de uiteindelijke foto een vergroot beeld van het preparaat. Goed uitgeruste SEM’s (met secundaire, terugverstrooiings- en röntgendetectoren) kunnen worden gebruikt om de topografie en atomaire samenstelling van specimens te bestuderen, en bijvoorbeeld ook de oppervlakteverdeling van immunolabels.
